我认为@akrun 在编程方面有一个很好的答案,但是由于这个问题也与统计有关,所以提到使用多个 t 检验可能不被认为是统计上合理的分析方法似乎很重要,取决于完整数据集中的比较次数。所以请记住这一点。至少,在这里建议应用 Bonferroni 校正或类似方法。所以我把它添加到@akrun 的代码中。
在运行 t 检验之前,最好运行 ANOVA 以查看总体上是否存在任何差异。哥伦比亚大学在他们的统计页面上有对这种方法的有用解释。
也就是说,为了回答问题的编程方面,我将向您展示如何做到这两点,但是对于那些查找相同问题的人,请在使用此答案之前仔细检查您的方法。
我通过 R 中的 options(scipen=999) 显示了以下没有科学记数法的结果,以方便那些不太熟悉它的人。
前 t 检验方差分析:
summary(aov(val ~ as.factor(Gene), data=gather(df, key, val, -Gene)))
Df Sum Sq Mean Sq F value Pr(>F)
as.factor(Gene) 2 2627772989 1313886494 34.49 0.00000245 ***
Residuals 15 571374752 38091650
---
Signif. codes: 0 ‘***’ 0.001 ‘**’ 0.01 ‘*’ 0.05 ‘.’ 0.1 ‘ ’ 1
T检验:
library(broom)
library(dplyr)
library(tidyr)
gather(df, key, val, -Gene) %>%
do(data.frame(tidy(pairwise.t.test(.$val, .$Gene, p.adjust="bonferroni"))))
group1 group2 p.value
1 3 1 0.05691493022
2 4 1 0.00000209244
4 4 3 0.00018020669
编辑:
对于这些测试,观察的长度是否不完全相同并不特别重要。我上面概述的代码仍将运行。但是,在 R 中,使空白或空值等于 NA 通常是一种很好的做法。有关将值更改为 NA 的方法,请参阅此SO 答案。
如果您想将 t 检验限制为仅进行少数基因比较,例如基因 1 与基因 3 和基因 1 与基因 4,而不是基因 3 与基因 4,最简单的方法是仍然使用上面的代码。但是,不要在 pairwise.t.test 函数中应用 p 值校正,而是仅在您要评估的 p 值上应用它。尝试这个:
res <- gather(df, key, val, -Gene) %>%
do(data.frame(tidy(pairwise.t.test(.$val, .$Gene))))
res <- res[res$group1==1 | res$group2 ==1,]
res$p.value <- p.adjust(res$p.value, method = "bonferroni")
print(res)
group1 group2 p.value
1 3 1 0.015989134399
2 4 1 0.000001458475
请注意,上述内容仅对我们已子集化并要评估的测试应用 p 值校正,对于此示例,它是涉及基因 1 的任何组合,不包括不涉及基因 1 的组合。